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CÁLCULO DE LA CONCENTRACIÓN DE LÍPIDOS TOTALES.
OBJETIVO

Supongamos que llevamos a cabo una valoración de lípidos totales de una muestra biológica empleando el método colorimétrico de N. Zöllner y K. Kirsch.
Debemos utilizar un patrón lipídico de concentración conocida para calcular los parámetros de una "recta patrón", que relaciona mg de lípido vs absorbancia.
Dicha "recta patrón" nos permitirá calcular la concentración de la muestra(s) problema.
En esta práctica debe hacerse una hoja de cálculo con MS Excel que automatice el cálculo de la concentración de lípidos de la muestra problema.

ELEMENTOS DE PARTIDA

1.- Para la construcción de la recta patrón:

Tomará 6 puntos experimentales. Partiendo de un patrón de 5 mg/ml pondrá en cada tubo de ensayo 0, 0.4, 0.6, 0.8, 1, 1.2 y 1.4 ml. respectivamente y después de finalizar el protocolo experimental medirá la absorbancia a 520 nm. Además, habrá hecho por triplicado el ensayo para disminuir el error. La tabla de datos resultante:

La representación gráfica de estos datos se puede ver en la siguiente figura:

La ecuación de la recta tiene la forma:

Abs = pendiente *[mg lípido] + ordenada en el origen.

Excel nos permite hacer una regresión lineal y calcular la pendiente y la ordenada en el origen. Para este tipo de experimentos la ordenada en el origen ha de ser cero, y se corresponde con el "blanco" del experimento.

2.- Para obtener datos de absorbancia de la muestra problema:

Se tomarán 2 alicuotas por cada muestra de la que desee conocer la concentración de lípidos totales, cada una de ellas de 1.4 ml de muestra problema.

Las ABS del la muestra problema son: 0.298 y 0.331.

Con estos datos se debe calcular la concentración en mg/ml de la muestra problema, previa construcción de la hoja de cálculo Excel 2003.

Como datos orientativos, los cálculos del profesor son:

Y=0.1068*X, y la siguiente hoja de cálculo como ejemplo.

EVALUACIÓN

Se pedirá a cada alumno que construya la hoja de cálculo con Excel y haga el cálculo de la concentración de lípido total en esa muestra biológica.

SOFTWARE

El paquete de MS Office, en cualquiera de sus versiones.