OBJETIVO
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La ecuación de Michaelis-Menten explica las curvas que se obtienen cuando los datos de velocidad se representan frente a la concentración de sustrato. La curva resultante es una hipérbola rectangular donde es difícil determinar las constantes cinéticas Vmax y Km. Por ello, para facilitar la determinación de estas constantes cinéticas, los datos se representan generalmente de una de las formas lineales descritas a continuación y obtenidas a partir de la reestructuración de la ecuación de M-M en una forma lineal del tipo y= mx + b:
1. Linewaever-Burk.- 1/v frente a 1/[S]
2. Hanes-Woolf.- [S] /v frente a [S]
3. Woolf-Augustinsson-Hofstee.- v frente a v/[S]
4. Eadie-Scatchard.- v/[S] frente a v
ELEMENTOS DE PARTIDA
1.- Datos experimentales.
2.- Hoja realizada por el profesor para comparar con la que realicen los alumnos.
EVALUACIÓN
Se pide a cada alumno que construya una hoja de cálculo con Excel para automatizar el cálculo de los parámetros cinéticos Vm y Km mediante todos los métodos de representación lineal comentados anteriormente, a partir de un conjunto mínimo de 50 pares de datos experimentales de velocidad (v) y concentración de sustrato [S]. Acompañar al resultado de cada método las representaciones gráficas correspondientes.
SOFTWARE
El paquete de MS Office, en cual quiera de sus versiones.